牛磺酸修饰巯基化壳聚糖季铵盐载体的合成及其体外shTNF-α pDNA递送效果

更新时间:2023-05-28

【摘要】本研究合成了牛磺酸修饰壳聚糖季铵盐(TT)和牛磺酸修饰巯基化壳聚糖季铵盐(TTC)聚合物,再利用TT和TTC包载沉默肿瘤坏死因子-α表达的质粒编码短发夹RNA(shTNF-αpDNA),形成TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA纳米粒,研究了两种纳米粒理化性质、体外摄取和体外基因沉默效果.结果表明:TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA粒径在180～305nm之间,电势在12～20mV之间,分散性良好;TTC-shTNF-αpDNA pH稳定性能优于TT-shTNF-αpDNA;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均先突释后缓释;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均可显著提高pDNA细胞摄取,TTC-shTNF-αpDNA细胞摄取量显著高于TT-shTNF-αpDNA;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均以能量依赖方式入胞,通过巨胞饮和小窝蛋白介导的途径入胞,TTC-shTNF-αpDNA会通过网格蛋白介导的内吞途径入胞,TT-shTNF-αpDNA则不通过此途径入胞;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均可有效递送shTNF-αpDNA入胞,从而抑制TNF-α蛋白表达,TTC-shTNF-αpDNA组基因沉默效果优于TT-shTNF-αpDNA组.因此,TTC有望作为合适的口服基因递送载体.

【关键词】 牛磺酸修饰 巯基修饰 shTNF-α pDNA 基因递送 基因沉默

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